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400-021-2021
產品介紹
LN-229 人膠質瘤細胞/STR鑒定介紹
該細胞建系于1979年，細胞來源于一個右額頂枕葉膠質母細胞瘤患者。細胞顯示p53突變，同時在p16及p14ARF 腫瘤抑制基因可能存在缺失。他們均含有野生型PTEN 基因。
細胞特性
1） 來源：膠質母細胞瘤
2） 形態：上皮細胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。
LN-229 人膠質瘤細胞/STR鑒定用途：僅供科研使用。
細胞接收后的處理：
1） 收到細胞后，請檢查發貨培養瓶的狀況，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X和20×物鏡下，同時給剛收到的細胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態的依據。
3） 觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。
4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象，如發現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長，可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基的原培養瓶中（或新的培養瓶中）。
5） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中（加入按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基）。
6）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。 收到細胞后di一次傳代建議1：2傳代 。
細胞培養步驟
一．培養基及培養凍存條件準備：
1） 準備DMEM（推薦iCell-0001）培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注：di一次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和技術服務：
一、原代細胞服務
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源；
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等；
原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務；
二、細胞株/系服務
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關說明書；
細胞系培養過程的技術指導；
細胞系培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等；
三、iPS細胞
iPS細胞基礎培養（有滋養層or無滋養層在）；
iPS細胞增殖及冷凍保存；
iPS基礎培養技術實習；
新藥及實驗儀器上市前評估；
四、技術外包服務：各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等
五、其他：根據客戶需要定制服務等
序號 | 產品名稱 | 貨號 | 規格 | 售價 | 備注 |
1 | 培養基1640 | icell-0002 | 500ml | 140 |
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2 | 培養基DMEM | icell-0001 | 500ml | 140 |
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3 | 培養基DMEM/F12 | icell-0005 | 500ml | 140 |
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4 | 內皮細胞培養基ECMsciencel | icell-0016 | 500ml | 2280 |
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5 | 動物上皮細胞培養基Epicm-a | icell-0015 | 500ml | 1980 |
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6 | 上皮細胞培養基Epicm | icell-0017 | 500ml | 1980 |
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7 | Mccoy’s 5A 培養基 | icell-0011 | 500ml | 160 |
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8 | MEM培養基 | icell-0012 | 500ml | 140 |
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9 | FBS北美胎牛血清 | GIBCO 16000-044 | 500ml | 6800 |
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10 | FBS墨西哥胎牛血清 | 10437-028 | 500ml | 5616 |
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11 | 馬血清 | gibco.16050122 | 500ml | 1489 |
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12 | DMSO | sigma-D2650 | 100ml | 1520 |
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13 | PBS片劑（1000ml） | 09-9400-100 | 100片 | 4170 |
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14 | PS雙抗（進口） | 15140-122 | 100ml | 452 |
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15 | yi蛋白酶 | 25200-072 | 500ml | 665 |
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